纵隔淋巴管瘤

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流式小课堂流式细胞术在白血病中的应用 [复制链接]

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白血病是一类造血干细胞的恶性克隆性疾病,临床可表现为发热、贫血、淋巴结肿大、乏力、多汗等,因白血病细胞的生长障碍,导致白细胞停滞在细胞发育的不同阶段,进而在骨髓和其他造血组织中大量累积,使正常造血受到影响,临床可分为急性白血病和慢性白血病。

白血病分类

急性白血病(AL)

1.急性淋巴细胞白血病(ALL)

2.急性髓系白血病(AML)

慢性白血病(CL)

1.慢性淋巴细胞白血病(CML)

2.慢性髓系白血病(CLL)

3.毛细胞白血病

4.幼淋巴细胞白血病

主要病因

生物因素

主要是病*感染和免疫功能异常,病*感染机体后,作为内源性病*整合并潜伏在宿主细胞内,在某些理化因素作用下,即被激活表达而诱发白血病;或作为外源性病*由外界以横向方式传播感染,直接致病。

物理因素

包括X射线、γ射线等电离辐射,大面积和大剂量照射可使骨髓抑制和机体免疫力下降,DNA突变、断裂和重组,导致白血病的发生。

化学因素

多年接触苯以及含有苯的有机溶剂与白血病发生有关。

遗传因素

家族性白血病约占白血病的0.7%,单卵孪生子如果一个人发生白血病,另一个人的发病率为1/5,比双卵挛生者高12倍。

其他血液病

某些血液病最终可能发展为白血病,如骨髓增生异常综合征、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。

白血病免疫分型

血液细胞在生长发育过程的不同阶段表现为不同的形态,其表面还有不同的标记,处于不同阶段的细胞,如原始细胞、幼稚细胞、成熟细胞,其表面有不同的标记,好比不同的人有不同的脸部特征一样,流式细胞术可根据这些标记的不同,使用相应的抗体将细胞分类,决定属于那种类型的白血病。此种白血病的分型即为免疫分型。

骨髓血细胞是形态学分型的基础,流式细胞术白血病免疫分型是对形态学分型的重要补充和深化。国际白血病MIC分型写作组认为,免疫分型对每一例急性白血病都是必不可少的,特别是用形态学、细胞化学染色不能肯定细胞来源的白血病。

另外,还可根据抗原的表达情况预测病情的预后,如白血病患者有CD7+与CD34+共表达,预后较差。白血病免疫分型还对疾病监测起着重要作用,可监测病程的发展、疗效,并可进行微小残留白血病的检测。

流式细胞术相比其他技术优势

在流式细胞术(FCM)普及以前,急性白血病的诊断方法主要是细胞形态学和细胞化学,准确性依赖阅片人员的经验,相对来说比较主观;且难以区分系列,尤其T系和B系的区分。

传统的FAB分类根据细胞大小,将ALL分为L1、L2、L3三类;但是这三类中既有T-ALL,也有B-ALL,甚至后来ALL-L3被发现是一类特殊的疾病(伯基特淋巴瘤)。FCM的优势在于客观,准确、快速。分析过程在单细胞水平进行,分别检测其形态、大小、荧光特征及抗原表达,对AL进行客观而又准确的诊断。特殊类型的急性白血病更是在诊断标准上要依赖于FCM。

因此在MICM分型中,即白血病形态学(morphology)、免疫学(immunology)、细胞遗传学(cytogenetics)、分子生物学(immunology),免疫学是重中之重。FCM分析速度也很快,可达到~个/秒,最新的流式细胞仪可以达到个/秒以上。另外FCM可检测样本种类也较多,包括骨髓、外周血、脑脊液、胸腹水及皮肤组织、淋巴结等,因此FCM对于AL的髓外浸润同样也可作出诊断。

FCM也具有很高的敏感性,在获取50万个细胞基础上,敏感性能到达,获取细胞数更多的情况下,敏感性能达到与PCR同级别,而且实验过程更加快速,设施不需要PCR那么严格。另外PCR以及细胞遗传学对于AL的诊断限于存在特定分子学改变的病例,应用范围受到影响。而FCM不存在这个问题,在此基础上还具有目的细胞群的分选功能。

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